前言 

蛋白水解靶向嵌合體 (PROteolysis TArgeting Chimeras,  PROTACs)，是一種利用泛素-蛋白酶系統 (Ubiquitin-Proteasome  System, UPS) 對靶蛋白進行降解的藥物開發技術。PROTAC是一個 兩端含有不同配體的化學分子，一端是結合E3連接酶的配體，另 一端是結合細胞內蛋白質的配體，這兩個配體再由一段連接子連 接起來。這樣的化學分子既可以結合E3泛素連接酶，又可以結合 細胞內蛋白質，通過把靶向的蛋白質招募到E3泛素連接酶附近來 實現靶向蛋白質的多泛素化，最后被蛋白酶體降解。PROTAC的特 點是可以循環使用，而不被蛋白酶體降解。在患者體內，PROTAC 的靶蛋白配體和靶蛋白結合，E3泛素連接酶配體和細胞內的E3泛 素連接酶的底物結合區結合，從而通過連接子把靶蛋白拉進到E3 泛素連接酶旁邊，實現UPS系統將靶蛋白降解[1]。 

GNE-987是一種降解溴結構域蛋白4 (BRD4) 的PROTAC，由VHL 配體、BRD4配體與間隔基團組成，具有皮摩爾級別的BRD4降解活 性，所以這也給它的安全性和活性評價帶來了一定難度。 

 本方法采用甲基叔丁基醚萃取法將樣品進行前處理，氮氣 吹干并復溶的方式，通過SCIEX Triple Quad? 系統對大鼠血漿中 PROTAC藥物GNE-987進行直接定量分析，該方法特點如下： 

1.SCIEX Triple Quad? 系統，儀器操作簡便，能夠對目標物實現 高靈敏度和高穩定性的檢測；

2. 采用甲基叔丁基醚對血漿樣品進行萃取后，再吹干復溶，樣品 處理周期短，開發成本低，可獲得較高的提取回收率，有效避 免基質效應產生； 

3. 方法檢測靈敏度高，LLOQ可達2 pg/ml，濃度范圍在2 pg/ml ~  10 ng/ml呈良好的線性關系，低濃度點連續進樣6針，%CV小于 6%。