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看完才知道，原來磁珠檢測可以更簡單準(zhǔn)確（下）
上篇我們介紹了磁珠性能及其檢測方法（上期回顧），本篇我們將繼續(xù)講解如何使用庫爾特法來進(jìn)行磁珠的粒徑和濃度控制。
測試條件
使用儀器型號：貝克曼庫爾特Multisizer 4e庫爾特計數(shù)和粒度分析儀
小孔管的選擇：30um
檢測粒徑范圍: ??0.6-18um
電解液：Isotone II
燒杯：100mL標(biāo)配玻璃杯
測試結(jié)果和分析
1?均一性好的磁珠粒徑分布和顆粒計數(shù)
200uL磁珠混懸液加入到100mL Isotone II電解液中，攪拌混勻后連續(xù)測試3次，得到如上所示的粒徑分布圖，并且通過定量分析，可以統(tǒng)計得到不同粒徑區(qū)間內(nèi)的顆粒數(shù)占比，對于粒徑集中在4.5-7.0um單峰標(biāo)樣，我們可以定量分析得到濃度是1.30x108個/mL。
2?均一性差的磁珠粒徑分布和顆粒計數(shù)
同樣200uL的磁珠混懸液加入到100mL Isotone II電解液中，攪拌混勻后連續(xù)測試3次，得到的粒徑分布圖中有2個主峰和1個拖尾的肩峰。按3.26um，4.00um作為間隔粒徑，可以對著3個峰分別進(jìn)行分析，可以看到在2-18um粒徑區(qū)間內(nèi)的顆粒濃度3.56x108個/mL，其中2.00-3.26um最高峰顆粒濃度是2.21x108個/mL（占比62%），而位于3.26-4.00um的第二主峰濃度1.10x108個/mL（占比31%），兩個峰占比總和超過90%。
另外，兩個主峰的Peak粒徑分別是2.930um和3.563um，粒徑比為1: 1.2，以目前的激光粒度儀或納米粒度儀都無法分辨出是2個峰，而只展示出1個單峰的結(jié)果，對于需要均一性好的用戶而言，庫爾特法做磁珠的生產(chǎn)質(zhì)控?zé)o疑更加可靠。
3?CAR-T細(xì)胞激活用磁珠的濃度監(jiān)控
CAR-T細(xì)胞激活用磁珠的濃度需要和細(xì)胞成一定的倍數(shù)，從而才能達(dá)到有效的激活。此次測試得到磁珠的濃度在3.90x108個/mL，和標(biāo)稱的數(shù)據(jù)可以吻合，但有時因為存在批次間的差異，磁珠的濃度可以差50%以上，此時按標(biāo)稱的濃度添加到CAR-T細(xì)胞中，將無法有效地激活所有的CAR-T細(xì)胞，最終就會導(dǎo)致刺激實驗的失敗。
總結(jié)
通過Multisizer 4e庫爾特計數(shù)和粒度分析儀，使用30um小孔管可以對600nm-18um范圍內(nèi)的磁珠做準(zhǔn)確的粒度分布和不同粒徑區(qū)間的顆粒數(shù)統(tǒng)計，相比常規(guī)的粒徑檢測方法分辨率更高，是一個很好的檢測磁珠粒徑大小和分布，以及確定磁珠濃度的分析方法。
