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蛋白凍干技術和凍干后的影響

2020.5.11

第一:什么是蛋白?

蛋白又名雞子白,異名雞卵白(《別錄》)、雞子清(《食療本草》)。為雉科動物家雞的蛋白,是常見的食品。營養優良、潤肺利咽、清熱解毒。

第二:蛋白為什么要凍干?

蛋白質對熱敏感,凍干能使絕大部分蛋白質的活性保留下來,提高蛋白的穩定性并延長保存時間,同時降低運費。

第三:凍干對蛋白會有哪些影響?

凍干有可能會造成蛋白的活性部分損失,聚集和其它變性問題。但可以通過添加保護劑(穩定劑,添加劑,輔料)和控制凍干的各種條件來盡可能降低這些負面的影響。

第四:凍干對蛋白前為什么向蛋白溶液中加保護劑?

保護劑是用來在凍干和儲存過程中保護蛋白的。

第五:一般凍干保護劑有哪幾種?

常用的保護劑或穩定劑有糖類,多元醇,聚合物,表面活性劑,某些蛋白和氨基酸等。

本公司常用的保護劑:通常加8%(質量比體積)的海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑。

海藻糖可明顯阻止蛋白質二級結構改變以及凍干過程中蛋白質的伸展和聚集。

甘露醇也是一種普遍應用的凍干保護劑和填充劑。有文獻報道甘露醇可以降低某些蛋白的凍干后聚集情況。

第六:怎樣復溶蛋白干粉?怎樣復溶蛋白干粉?

建議使用過濾后的無菌純化水作為復溶劑。添加純化水至推薦的體積,輕輕搖晃西林瓶,使蛋白溶解完全均勻。

注意事項:切忌劇烈搖晃。輕輕搖晃西林瓶,使蛋白溶解完全均勻。

PBS或者其它緩沖液也可以用來做復溶劑,因為PBS中的鹽可以在體積微量的情況下忽略不計。如果可能,可以做一下兩種復溶劑的效果比較。

第七:為什么有的蛋白帶標簽?

使用蛋白標簽的最初目的用于蛋白純化。此外,在某些試驗中可以用于檢測蛋白。Fc標簽有穩定融合蛋白的作用。 Fc可以自主的形成二聚體,因此他可以幫助融合蛋白,特別是受體,形成有活性的二聚的形式。

第八:標簽會影響蛋白活性嗎?

具體情況具體分析。對于某些應用,小的標簽,如組氨酸標簽,可能對蛋白活性的影響比較小,因此也無需將其去除。如果擔心標簽是不是會對蛋白活性有影響,可以咨詢客服進行查詢。另外,有些蛋白標簽是可以通過酶切去除的。


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