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PRM靶向蛋白檢測

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產品介紹

靶向蛋白質組技術，顧名思義是只選取和檢測目標蛋白相關的信號，忽略其他無關的信號，因此可以實現對目標蛋白定量的高特異性和高準確性。PRM是Labelfree 、iTRAQ/TMT等組學技術的好伙伴。大規模組學技術不可避免地存在定量假陽性的問題，組學結果往往需要采用特異性的檢測方法來驗證。目前最常規的方法如蛋白水平WB、ELISA，而PRM在后續靶蛋白驗證方面具有獨特的優勢：不依賴抗體，可選擇性、特異性地對目標蛋白質進行定性定量分析（或定量分析）。

PRM（平行反應監測，Parallel Reaction Monitoring）是一種基于高分辨、高精度質譜的靶向蛋白質組學技術，能夠對目標蛋白質、目標肽段有針對性的選擇數據進行質譜數據采集，對于符合目標離子規則的信號進行采集，去除不符合規則的離子信號的干擾。從而實現對目標蛋白質/肽段進行定性定量。

技術原理

PRM是相對于傳統SRM/MRM建立起來的高分辨率離子監測技術。PRM基于Q. Orbitrap為代表的四級杄-高分辨質譜平臺,與SRM每次掃描一個Transition不同,PRM每次對一個母離子生的所有Transition進行全掃描,即平行監測了一個母離子對應的所有離子對。PRM質譜分析經過三個階段:1,通過MS篩選岀與目標分子特異性一致的母離子;2,碰撞碎裂這些母離子,去其他離子的干擾;3.只對選定的特異MS/MS2離子進行質譜信號的采集。PRM質譜技術是高精準度的蛋白定量鑒定技術,是一次性精準定量硏究復雜樣品中多個目標蛋白的方法。如果借助同位素標記的目標肽段作為內參,可以實現蛋白定量鑒定。

PRM技術流程圖