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大昌華嘉科學(xué)儀器
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氨基酸分析儀檢測(cè)膠原蛋白海綿

2024-12-06
  • 化工試劑/助劑/日用化學(xué)品
  • 氨基酸分析儀檢測(cè)膠原蛋白海綿
  • 氨基酸分析儀檢測(cè)膠原蛋白海綿
  • https://www.dksh-instrument.cn/Solution/611
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Biochrom 30+
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摘要

本品為未知含量及種類的膠原蛋白海綿制成品，樣品為棉絮狀。使用Biochrom30+全自動(dòng)氨基酸分析儀，對(duì)其所含的氨基酸組分及含量進(jìn)行分析。結(jié)果表明該未知樣中氨基酸各單個(gè)氨基酸含量的濃度見附頁結(jié)果表。樣品中均包含羥脯氨酸，此次測(cè)試使用氧化水解程序進(jìn)行測(cè)試，已驗(yàn)證羥脯氨酸可使用氧化水解進(jìn)行測(cè)定。


一、樣品前處理

1、所用試劑

1.1 Loading Buffer：鈉鹽系統(tǒng)，pH 2.2

1.2 濃鹽酸，濃度≥36%,優(yōu)級(jí)純

1.3 6mol/L 鹽酸：取500mL 鹽酸加水稀釋至1000mL,混勻

1.4 水：去離子水

1.5 18種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品


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2、前處理設(shè)備

1）分析天平:精度為 0.0001g

2）移液槍及槍頭

3）一次性注射器及0.22um濾膜

4）真空干燥烘箱

5）無油真空泵

6）電熱平板及稱量瓶


3、樣品制備（參考GB/T 1453-2016）

取干燥恒重后的樣品置于水解管中，精密稱定，加入水解管中，加入10mL 6mol/L鹽酸(1.3)，冷凍3min?5min,接到真空泵的抽氣管上,抽真空,然后充入氮?dú)?重復(fù)3次后，在充氮?dú)鉅顟B(tài)下擰緊螺蓋。將水解管放入真空干燥箱中，110°C水解22-24h，冷卻、混勻、開管，在電熱平板上60℃濃縮至干，必要時(shí)加入少許水(1.4)，重復(fù)蒸干1-2次，加入適量PH2.2的稀釋上機(jī)用檸檬酸鈉緩沖液溶解(1.1)，振蕩混勻后,吸取溶液通過0.22 μm 濾膜后，轉(zhuǎn)移至進(jìn)樣瓶，為樣品測(cè)定液,供儀器測(cè)定用。


二、氨基酸分析儀分析方法參數(shù)（Biochrom 30+）：

1）色譜柱：Biochrom Na型陽離子交換樹脂柱，4.6x20cm

2）分離程序：


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運(yùn)行時(shí)間：經(jīng)分析時(shí)間+再生時(shí)間 87.40 min

3）反應(yīng)單元溫度：135°C

4）檢測(cè)波長：570nm、440nm同時(shí)檢測(cè)


三、樣品中氨基酸含量的計(jì)算

樣品測(cè)定液氨基酸的含量按式(1)計(jì)算:

Ci = Cs/As × Ai× F ······························· (1)式中:

Ci ——樣品測(cè)定液氨基酸i的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Cs ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的含量,單位為納摩爾每毫升(nmol/mL);

Ai ——試樣測(cè)定液氨基酸i的峰面積;

As ——氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液氨基酸s的峰面積;

F ——樣品稀釋倍數(shù)。


附、氨基酸制成品中的酸水解氨基酸其分析圖譜及做樣結(jié)果：

圖1.  樣品01


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圖2.  樣品02


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圖3.  樣品03


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